常盤公園にある、宇部市熱帯植物館が主催する春季学習会は、
17年4月から毎月2回開催され7月迄8回にわたり開かれます。
第3回目の学習会は5月14日無菌培養の培地作りとセントポーリアの移植
常盤公園にある、宇部市熱帯植物館が主催する春季学習会は、
17年4月から毎月2回開催され7月迄8回にわたり開かれます。
第3回目の学習会は5月14日無菌培養の培地作りとセントポーリアの移植
セントポーリア
セントポーリアはイワタバコ科の多肉質
の葉を持つ多年草(非耐寒性)で原産地
はタンザニア・ケニアです。
小型なので室内で栽培を楽しめ、大変な
人気があり、世界中で栽培されています。花の色は赤・桃・紫・青・白など変化があり、
花の形も一重・八重など沢山の種類があります。今回は無菌培養の培地の作り方を基本から
研修し、セントポーリアの「バウァウ」の大量
増殖の実習が行われました。
左の写真は「バウァウ」です。
セントポーリアの株 移植する葉を取り出すためのばらし セントポーリアの葉を切り移植する
培地について
まず、無菌培養という環境を考える前に、一般的な植物の生育の場面を見てみましょう。
植物の成長には、光、温度、水などと並んで欠かせないものの−つに、〔養分」があります。
タンパク質や糖類など植物の体を作っている物質の源となる元素は、大気や水から取り入
れるＣ（炭素）Ｈ（水素）Ｏ（酸素）のほか、土壌の成分から取り入れられる元素として、
現在16種類が挙げられています。栽培下では不足気味になりやすい元素は肥料として
与えられ、必要量によって多量要素・中量要素・微量要素に分けられます。
多量要素 窒素・リン酸・カリウム
中量要素 カルシウム・マグネシウム・イオウ
微量要素 鉄・ホウ素・マンガン・亜鉛・モリブデン・銅・ニッケル・コバルト・ヨウ素
培養では、上記のような成長に必要な養分を培地から供給するほか、成長過程を
コントロールする目的で植物ホルモンを添加することも行われます。また、ビタミン類、
アミノ酸などが必要になる場合もあります。
このように培養の目的を満たす培地租成の研究は植物バイオテクノロジーの分野では
大きなテーマとなつています。
培養の目的に応じて、次のような中から必要なものを組み合わせて培地を調製します。
1．栄養要素(養分）
無機栄養要素…上で挙げた多量要素・中量要素・微量要素
有機栄養要素…糖類・アミノ酸・ビタミン類・糖アルコール
2．混合物 微粉ハイポネックス
3．生長調節物質（植物ホルモン）
NAA ナフタレン酢酸・BA ペンジルアデニン
4．天然物 果汁イースト酵母抽出物 ・ココナッツウォーター
5 培地固化剤・支持体 寒天・ゲルライト・バーミキュライトなど
6．水 蒸留水を用いる。
ＭＳ培地
Murashige and Skoog培地（MS培地）は組織培養ではもっとも広く使われている
培地で、1962年タバコのカルス培養用の培地として開発されました。現在でも多くの
植物で、基本的な培地として利用されています。
無機塩類の濃度を2分の1にしたり（1/2MS培地）、窒素成分における硝酸態窒素
とアンモニア態窒素の比率を変えたりといった改変を行なうこともあります。
2．ＭＳ貯栽液を使って
MS培地の種々の成分を所定の農度で含むようにつくるには、基本培地粉末を用
いる方法と、培地成分の貯蔵液（培地に含まれる漫度の50倍から200倍の漫虔で溶
かした溶液）をいくつかに分けて作り、希釈して混合する方法があります。
基本倍地粉末を用いる方法に比べて、成分の濃度を変えるなどの調節がしやすい、
1リットル以外の培地量の調製に対応できる、培地を大量に作る場合には安価である
などのメリットがあります。
（1）貯蔵液の作り方
各成分が化合して溶けにくくなったり、分解してしまったりするのを防ぐため5種類
(成分内容は省略)に分けてつくり冷蔵庫や冷凍庫で保存する。
貯蔵液1 〜4は冷蔵保存
貯蔵液5は小分けにして冷凍保存
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 培地の貯蔵液５種類を定量測定 してビーカーに注入 総て投入した後 良く溶かします。 左下の写真は 攪拌機で攪拌して いる状態 右下の写真は PH測定器で 5.8に調整 |
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 培養容器(空き瓶)に分注後ふたをして オートクレイブで減菌する。 |
�� 200mlの培地
NAA O.1ppmBAO.1ppm�� 1リットルの培地
ホルモンを含まない（HF）蒸留水 約140m 蒸留水 約700m 20 ml 1) 貯蔵液 4 mI
1) 貯蔵液 2) 貯蔵液 2 mI 2) 貯蔵液 10 ml 3) 貯蔵液 2 mI
3) 貯蔵液 10 ml 4) 貯蔵液 2 mI
4) 貯蔵液 10 ml 5) 貯蔵液 1 mI
5) 貯蔵液 5 ml NAA 100ppm液
BA 100ppm液0.2ml
0.2ml
ショ糖 6 g ショ糖 30 g よく溶かしてPHを5.8に調製する 蒸留水を足して全量200mlにする 蒸留水を足して全量1000mlにする ゲルライトを0.6g加えて電子
レンジで加熱しよく溶かし攪拌ゲルライトを2.8g加えて電子レンジで加熱しよく溶かし攪拌する 試験管に培養容器を分注後ふたをしてオートクレープで波菌する 空き瓶に培養容器を分注後ふたをしてオートクレープで減菌する
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